BIA Separations Alkalizator连续裂解设备精瑞科学Lab Workshop实验成功举办

【质粒大逃杀现场直击：昨夜实验室上演“泡沫惊魂”，肇事质粒表示“裂开了”】

各位亲爱的小试管、离心管以及熬夜写论文的研发狗们：

就在昨晚23:45分，本实验室那台号称“质粒屠宰场”的连续裂解设备在Workshop实操中，成功上演了一场堪比好莱坞大片的爆裂戏码。据目击者移液器描述：“当时只听设备发出一阵类似吃坏肚子的咕噜声，紧接着透明管道里突然涌出彩虹色的泡沫——像极了实验室经费在燃烧。”

现场还原：

当博士小李按下启动键时，设备突然发出摇滚乐般的震动节奏，反应液在管道里跳起了踢踏舞。原本应该优雅裂解的质粒DNA，竟在高压下集体上演“蹦迪式解体”，泡沫如火山喷发般从接口涌出，吓得隔壁细胞培养箱里的HeLa细胞都缩成了一团。

涉事质粒受访时表示：

“本来以为只是走个过场，没想到这次裂得这么有仪式感。”（注：该质粒为pUC19，以戏精属性闻名学界）

技术顾问王教授扶额总结：

“本次事故充分证明——当设备遇上caffeine超标的操作员，质粒的临终告别方式会变得相当…澎湃。”他还悄悄透露，肇事泡沫的彩虹色可能源于某研究生偷偷加进去的荧光标记，“说是为了让DNA死得花里胡哨”。

后续进展：

目前该设备已被贴上“内有暴躁质粒，投料需谨慎”的警示条。而始作俑者小李正边擦桌子边哼唱：“全都是泡沫，只一刹的花火~~” 据悉，课题组已决定将此次事故申报为“非线性裂解动力学教学案例”，并申请购买更结实的防溅罩。

（本报前方记者：那支总是写不出字的实验室记号笔 为您报道）

Hi聊结束，回顾正题：

Emmm，实操过程大概是这样：

得到的惊喜结果大概是这样：

使用碱化器精确控制碱裂解过程

• 裂解时间 5 分钟

• 在 10 分钟内处理 100 克大肠杆菌• 最终体积 ~3800 mL

纯度高，剪切力小

• 粗裂解物主要含有SC亚型，在PATfix上未观察到明显的OC、Linear/gDNA和Multimer峰

• 粗裂解物在室温下至少稳定超过 3 小时

高产量和回收率

• 基于我们的 5 kb pDNA 标准品的最终粗裂解物浓度为 79.1 μg/mL，总 pDNA 产量为 300.5 mg

• 基于计算的理论 pDNA 量为 310 mg

• 回收率：300.5/310=97%

• 在10分钟内以可控方式处理100克大肠杆菌，获得高纯度、高产率（300毫克）及高回收率（97%）。
• 高效过滤3.8升样品，约15分钟内无堵塞现象
• TFF去除部分杂质（如RNA、蛋白质），浓缩样品并调节电导率
• CIMmultus DEAE捕获了所有DNA异构体以及去除大部分杂质（如RNA、蛋白质）
• CIMmultus C4对用硫酸铵AS对质粒DNA进行精制，去除所有线性DNA和OC开环，获得超纯的SC pDNA。