极性化合物在常规C18 色谱柱上保留很弱,甚至在死时间就出峰了,用了纯水相流动相也没有办法得到改善。在填料多样化发展初期,有些方法中尝试使用离子对试剂。但是离子对试剂可以改变色谱柱表面化学特性,色谱柱的平衡时间很长,且该流动相与质谱不兼容。
赛默飞提供四种解决方案,轻松解决您实验室分析的难题。
色谱柱选择依据是首先尝试反相,如果反相策略依然不能使化合物有所保留,或者是质谱响应比较低,尝试HILIC 模式色谱柱。高极性化合物也可以选择石墨炭黑技术或者选择Acclaim 混合模式色谱柱。
1. 反相保留方法策略
耐受100%水相流动相,不会发生疏水塌陷---Acclaim PA2/Syncronis aQ 或者 Acclaim aQ 或者 Hypersil GOLD aQ。典型应用:色素,真菌毒素,农药残留,磺胺等分析;拉米夫定,阿莫西林和克拉维酸钾等。
2. HILIC保留策略
如果反相策略依然不能使化合物有所保留,或者是质谱响应比较低,尝试HILIC模式......
无键合的裸硅胶HILIC模式:Hypersil Gold Silica、Syncronis Silica,Accucore HILIC ---由于残余硅醇基的存在,表现出一定的阳离子交换功能,增加碱性化合物的保留。推荐用于分析中性/碱性化合物。典型应用:肾上腺素和去甲肾上腺素,胆碱,儿茶酚胺,生物碱等。
键合两性基团的HILIC模式:Syncronis HILIC,Acclaim HILIC-10,Accucore Urea-HILIC,Accucore 150-Amide HILIC,推荐分析中性和混合型化合物。Accucore 150-Amide-HILIC 适合分离各种亲水性分子,包括碳水化合物和肽,聚糖分析等。
其他基团HILIC模式:Hypersil Gold HILIC。聚乙烯亚胺键合相,其中的叔胺具有良好的亲水选择性和一定的阴离子交换活性。推荐用于酸性或中性化合物分析。典型应用:三聚氰胺和三聚氰酸分析。
3. 石墨化碳色谱柱Hypercarb--特殊的保留机制
吸附(分子的形状)和诱导偶极作用。适用于强极性化合物,可从水相基质中吸附极性化合物。典型应用:非衍生化氨基酸,利巴韦林,庆大霉素,草甘膦,氨甲基磷酸等,以及某些异构体的分离,如邻,对,间苯二甲酸异构体的分离。
4. Acclaim 混合模式色谱柱
a. 阴离子交换 / 反相:Acclaim Mixed-Mode WAX-1……同时具有疏水性和弱阴离子交换的特性,典型应用有布Ta比妥, 硝基酚类, 防晒剂(水杨酸辛酯, 甲氧基肉硅酸辛酯)等
b. 阳离子交换 / 反相:Acclaim Mixed-Mode WCX-1……同时具有疏水性和弱阳离子交换特性,为分离碱性分子提供理想选择性,典型应用有腺嘌呤, 对乙酰氨基酚制剂, 克霉唑等
c. 阴离子交换 / 阳离子交换 / 反相:Acclaim Trinity P1 & Acclaim Trinity P2 & Acclaim Trinity …… P1用于单电荷对离子和弱极性活性药物, 典型应用有Yan碱盐,双氯芬酸及对离子等;P2用于多电荷对离子和强极性活性药物,典型应用有青霉素及钠离子, 二甲双胍及对离子,磷酸根, 硝酸根;Q1为百草枯,敌草快分析专用。